小细胞外囊泡（sEVs），通常被称为外泌体，是由细胞释放的携带蛋白质、RNA和其他分子的微小颗粒。由于这些囊泡反映了产生它们的细胞的状态，它们作为疾病诊断和监测的潜在生物标志物引起了广泛关注。
血浆是细胞外囊泡的一个特别有吸引力的来源，因为它可以通过微创程序收集。然而，从血液中分离纯sEVs仍然具有挑战性，因为血浆含有大量可能污染样本的蛋白质和脂蛋白。
来自南洋理工大学（Nanyang Technological University）的研究人员研究了如何通过优化两种常用的分离方法——尺寸排阻色谱法（SEC）和密度梯度超速离心法（DGUC）——从小体积血浆中改善sEV分离。
SEC根据尺寸分离颗粒，有助于去除许多污染蛋白质。DGUC根据密度分离颗粒，提供额外的纯化步骤。虽然这两种方法通常单独使用，但研究人员希望确定将它们组合的最佳顺序。
研究团队仅使用500 μL血浆比较了两种工作流程：SEC后接DGUC（SEC-DGUC），以及DGUC后接SEC（DGUC-SEC）。
两种方法都成功分离出了高纯度的细胞外囊泡。然而，SEC-DGUC工作流程始终产生具有更高蛋白质和RNA产量的分离物，这表明此顺序在保持纯度的同时保留了更多的囊泡材料。
为了进一步评估分离的囊泡，研究人员使用了流式细胞术和质谱分析。这些分析证实了使用SEC-DGUC方法获得的细胞外囊泡制备物的质量和纯度。
优化方法的一个重要优势是它能够处理非常小的血液体积。这在样本量有限的临床环境中可能特别有用，同时仍能为下游分析提供足够的细胞外囊泡材料。
作者总结认为，SEC-DGUC高效、可重复，并且非常适合从血浆中分离高纯度的小细胞外囊泡。像这样的改进分离方法可能支持未来的生物标志物发现工作，并扩展外泌体的诊断应用。
Kong F, Upadya M, Wong ASW, Dalan R, Dao M. (2026) 使用尺寸排阻色谱法和密度梯度超速离心法从小体积血浆中分离小细胞外囊泡。eLife 13:RP92796。
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