摘要
目的:肠易激综合征(IBS)和炎症性肠病(IBD)与肠道菌群失调相关。研究表明Candida属过度生长可能引发IBS样症状,而真菌在IBD发病中具有关键作用。本研究旨在探讨Blastocystis与特定酵母菌在IBS和IBD患者中的关联性。
方法:2022-2024年间对91名受试者(20名健康对照,27名IBS患者,44名IBD患者)的粪便样本进行横断面研究。通过实时PCR检测C. albicans、C. tropicalis等9种酵母菌的存在及载量,统计分析变量间关联性。
结果:酿酒酵母(S. cerevisiae)和C. albicans为各组最常见菌种。IBD组C. albicans载量显著高于IBS组(880.421±2140.504 vs 10.307±15.206,p=0.005)。Blastocystis阳性个体中C. albicans载量差异显著(p=0.013),IBS患者中该菌数量最低。S. cerevisiae在IBD患者中比例较高(56.82%),但无统计学差异(p=0.077)。
结论:Blastocystis的存在与C. albicans载量增加及S. cerevisiae减少相关,提示真核生物间相互作用可能影响IBS/IBD进展。
1 引言
IBS是功能性胃肠疾病,全球患病率差异显著(1.1%-45%)。IBD包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),与西方饮食和工业化相关。近年研究发现肠道真菌组(mycobiome)与细菌组相互作用可能影响疾病进程,但Blastocystis等原生生物与真菌的关系尚不明确。
2 材料与方法
2.1 伦理审批
研究获沙希德·贝赫什提医科大学伦理委员会批准(IR.SBMU.RIGLD.REC.1403.014)。
2.2 样本采集
收集91份粪便样本(2022.2-2024.7),包括IBD(44例)、IBS(27例)和健康对照(20例)。排除标准:近1个月使用抗生素/抗真菌药物。
2.3 粪便钙卫蛋白检测
使用ELISA试剂盒检测IBD样本钙卫蛋白水平(>300μg/g提示活动期)。
2.4 DNA提取与Blastocystis鉴定
采用商业试剂盒提取DNA,通过SSU rRNA基因扩增鉴定Blastocystis。
2.5 真菌实时定量PCR
设计ITS区特异性引物,使用Rotor-Gene Q系统进行定量检测。建立标准曲线确保R>0.985。
2.6 统计分析
采用卡方检验、Mann-Whitney U检验和逻辑回归分析,p<0.05为显著。
3 结果
3.1 酵母菌分布
S. cerevisiae为优势菌种:IBS(70.37%)、IBD(56.82%)、健康对照(85%)。C. albicans在IBD(43.18%)和IBS(48.14%)中普遍存在。C. tropicalis和C. neoformans在所有组别均未检出。
3.2 定量分析
IBD组C. albicans载量显著高于IBS组(880.421±2140.504 vs 10.307±15.206,p=0.005)。Blastocystis阳性IBS患者该菌载量最低(p=0.013)。
3.3 临床关联性
粪便钙卫蛋白水平与IBD活动期显著相关(p<0.001),但与Blastocystis存在无显著关联(p=0.099)。
4 讨论
Blastocystis与S. cerevisiae和C. albicans存在共变关系:IBS患者中该原生生物阳性个体酵母菌比例升高。研究显示IBD患者C. albicans载量增加,提示其可能作为生物标志物。但真菌-原生生物互作机制仍需深入研究。
5 结论
Blastocystis的存在与C. albicans载量增加及S. cerevisiae减少相关,提示真核生物间相互作用可能影响肠道微生态平衡。该研究为IBS/IBD的微生态治疗提供了新思路。
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