摘要
本研究旨在探讨间充质外泌体与纳米姜黄素（NCUR）负载外泌体对实验性牙周炎的治疗作用。研究通过向42只大鼠注射脂多糖（LPS）建立牙周炎模型，分为未治疗组、外泌体单次治疗组（200μg外泌体）及纳米姜黄素复合外泌体治疗组（200μg外泌体+200μg NCUR）。另设14只对照组大鼠注射磷酸盐缓冲液（PBS）。实验采用组织学、组织化学及ELISA方法进行评估。结果显示，对照组（Group I）牙周膜纤维呈规则排列，龈沟上皮为非角化复层鳞状上皮；而未治疗组（Group II和V）出现牙周膜宽度减小及牙骨质/骨着色异常。单纯外泌体治疗组（Group III）呈现牙周纤维排列紊乱，但复合治疗组（Group IV和VII）的牙周纤维呈斜向排列且牙骨质/骨着色均一。Masson三色染色统计显示，治疗4周的复合外泌体组新生胶原含量最高，而未治疗组IL-1β炎症因子水平最高。纳米姜黄素负载外泌体可显著降低炎症反应并促进牙周组织再生。
引言
牙周炎是全球高发的慢性炎症性疾病，其特征为牙周支持组织进行性破坏。研究采用大肠杆菌LPS构建炎症模型，因其内毒素活性强于牙龈卟啉单胞菌LPS。选用Wister白化大鼠作为实验动物，因其牙周炎模型建立成功率高。外泌体作为间充质干细胞（MSCs）的分泌囊泡，可通过递送蛋白质、脂质和核酸调节细胞功能。纳米姜黄素因其抗氧化和抗炎特性成为潜在治疗剂，其与外泌体结合可提升生物利用度。
材料与方法
实验设计
56只4-5周龄雄性Wister大鼠随机分为7组（每组14只）：对照组（注射PBS）、2周和4周牙周炎组、单纯外泌体治疗组及纳米姜黄素复合外泌体治疗组。通过每周三次显微注射LPS（3μL/10mg/mL）建立牙周炎模型，治疗组在末次注射后立即给予外泌体干预。
外泌体分离与表征
外泌体从大鼠骨髓间充质干细胞培养上清中分离，经超速离心纯化。透射电镜显示外泌体呈卵圆形结构，直径约30-150nm。纳米姜黄素负载采用超声处理法，UV-Vis光谱证实负载效率达82%。
结果
组织学分析
治疗4周的复合外泌体组（Group VII）呈现以下特征：
- 牙周膜纤维致密排列，哈弗斯纤维附着
- 牙骨质和牙槽骨轮廓规则，成牙骨质细胞和成骨细胞层完整
- 龈沟上皮保持非角化状态，固有层胶原纤维致密
Masson三色染色显示：
- 对照组：新生胶原占比68.3±4.5%
- 单纯外泌体组（Group VI）：新生胶原占比62.1±3.8%
- 纳米姜黄素复合组（Group VII）：新生胶原占比65.9±4.2%
- 未治疗组（Group V）：新生胶原占比仅28.7±2.6%
ELISA结果显示：
- 纳米姜黄素复合组IL-1β水平较未治疗组下降76%（p<0.001）
讨论
本研究首次系统比较了外泌体与纳米姜黄素复合外泌体的治疗效果。结果表明：
- 外泌体通过递送miRNA（如miR-128-3p）促进成骨分化
- 纳米姜黄素增强外泌体的靶向性，抑制NF-κB通路激活
- 二者协同作用通过清除ROS和上调IL-10实现抗炎效应
实验创新性在于：
- 采用超声法构建纳米姜黄素复合外泌体载体
- 建立4周时程分析组织再生动态
- 结合透射电镜和免疫组化多维度评估
局限性包括：
- 仅使用雄性大鼠
- 未进行长期安全性评估
结论
本研究验证了纳米姜黄素复合外泌体的治疗优势，其机制涉及：
- 外泌体介导的miRNA递送促进牙周再生
- 纳米姜黄素增强抗炎效应
- ROS清除与胶原合成协同作用
该治疗方法为牙周炎局部递送提供了新策略，后续需开展灵长类动物实验验证。
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