研究发现H7N9病毒已出现耐药变异

复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室主任、上海市公共卫生临床中心兼职教授袁正宏研究员率领的新发传染病研究团队发现：个别人感染H7N9禽流感患者在达菲抗病毒治疗19天后仍在其咽拭子标本中检测到H7N9病毒核酸，这表明病毒已出现基因突变和耐药趋势。29日，这一成果已在线发表在国际顶尖医学杂志《柳叶刀》上，引起世界同行高度关注。

为指导人感染H7N9禽流感病例病情判断、临床治疗及出院等工作，袁正宏领衔的研究团队承担了检测患者标本中H7N9病毒核酸载量的重要任务。在上海市公共卫生临床中心应急病房医护人员的配合、支持下，收集了病人在治疗过程中多个时间点的咽拭子、血液、尿液和粪便标本，使用先进的、自行设计的荧光定量RT-PCR方法对标本中的H7N9流感病毒核酸载量进行了定量检测，并对其中14例患者进行了病毒载量与病情严重程度的相关性分析。

结果发现，病症相对较轻的患者在达菲治疗中，咽拭子的病毒载量显著下降并较快转阴；而重症患者，特别是在后期需要依靠人工肺治疗的患者，咽拭子的病毒核酸载量在达菲治疗过程中呈持续阳性、甚至载量进一步升高的罕见现象，并有个别患者在达菲抗病毒治疗19天后仍在其咽拭子标本中检测到了H7N9病毒核酸。

为解释这些不寻常现象，袁正宏率领胡芸文、王蔚、宋志刚等研究人员对H7N9禽流感病毒的2个最重要蛋白HA和NA，即患者标本中的这2个病毒基因序列进行扩增研究和多态性分析，结果发现2例重症病例在抗病毒治疗过程中体内H7N9毒株的神经氨酸酶（NA）“292位氨基酸”从R（精氨酸）突变为K（赖氨酸）。实验室运用先进的“Q-PCR单核酸多态性分析法”，有了进一步的发现：病人标本中“292R毒株”竟然出现了逐渐被“292K毒株”取代的过程。这一结果提示：这一突变毒株的出现可能与达菲治疗效果不佳有关。“NA R292K”的突变曾出现在季节性H3N2流感病毒上，以后研究证明该病毒对达菲耐药。香港大学微生物学家裴伟士教授的科研团队参与了耐药基因的发现和确认工作。

上海市H7N9禽流感防治专家组组长、微生物学专家闻玉梅院士认为，研究结果说明，达菲治疗依然对绝大部分患者有效，一旦确诊应尽早治疗；同时提示在达菲治疗前和治疗过程中必须要对病毒载量和耐药基因位点进行密切监测，及时调整治疗方案，以提高救治成功率。此外，加快新药研发显得尤为重要。