当医生怀疑患者是肺部感染时，微生物实验室会用“多层次检测体系”——把不同培养基的特点和分子诊断技术结合起来，像一张“网”一样捕捉病原体。
培养基的协同机制
血琼脂平板是最基础的培养基，能给大多数细菌提供生长需要的营养。它加了5%的脱纤维羊血，特别适合肺炎链球菌这类常见病原体生长。培养24-48小时后，看菌落周围的“溶血特征”就能判断：如果是绿色带，是α溶血；要是完全透明的环，就是β溶血。
巧克力平板是专门培养“苛养菌”（比如流感嗜血杆菌）的——用80℃加热过的全血做的，能让红细胞破裂释放出X、V两种因子。流感嗜血杆菌在上面会长出光滑、湿润的“露珠状”菌落，而且得在5%二氧化碳环境里培养48小时才能看到。
还有选择性培养基，是按特定病原体的需求设计的。比如BCYE培养基，里面加了L-半胱氨酸、活性炭和酵母浸液，专门培养军团菌。为了不让其他细菌干扰，还加了万古霉素、多粘菌素B这类抗生素。它需要在37℃微需氧环境里培养72小时，典型的军团菌菌落是蓝绿色或白色“天鹅绒状”的。
分子诊断技术演进
实时荧光PCR技术不用等细菌长大，灵敏度很高，哪怕样本里有100-1000个病原体基因拷贝都能查到。比如肺炎支原体、衣原体这类常见病原体，用多重PCR一次能查15-20种。它出结果只要3-4小时，比传统培养的3-5天快很多，但也有局限——没法区分活细菌和死细菌，还有1%-3%的假阳性可能。
宏基因组测序（mNGS）能查那些难培养的病原体，检出率比以前高很多。它会提取标本里所有生物的核酸，用高通量测序测出来，再和数据库比对，能查到鹦鹉热衣原体、嗜肺军团菌这类少见病原体。目前数据显示，它查细菌的灵敏度是88%-92%，特异性超过95%，但成本高，出结果要24-48小时，这是目前的短板。
标本处理与质量控制
留合格的痰标本有几个要点：早上的痰、从深部咳嗽出来、别混进唾液。实验室用Barth标准判断标本好不好——显微镜下每低倍视野里，鳞状上皮细胞少于10个、中性粒细胞多于25个才算合格。要是标本不合格，得重新留，不然口咽部的正常细菌会干扰结果。
革兰染色是快速初筛方法，30分钟就能出初步结果。比如肺炎链球菌是革兰阳性的双球菌，流感嗜血杆菌是革兰阴性的小杆菌。它识别主要细菌的准确率有85%，但如果是混合感染，可能会漏查。
三级检测体系的构建
现在实验室有“三级检测体系”：一级是常规培养+革兰染色（初筛）；二级是选择性培养+分子检测（深入查）；三级是血清学+宏基因组测序（验证少见或难查的病原体）。这套体系能覆盖90%以上的常见病原体，像支原体这类特殊的，还要加血清学检测（比如补体结合试验）确认。
医生诊断肺炎时，要结合患者的症状（比如发热、咳嗽）、肺部影像（比如浸润影）和实验室结果——只有查到特定病原体，才能确诊。比如查到嗜肺军团菌阳性，还要问患者最近有没有接触过冷却塔的水，综合判断。
