血液样本处理是医学检验的重要环节,当离心设备无法使用时,自然沉淀法就能作为可靠的替代方案。这种依托血液物理特性实现分离的技术,在特定场景里依然保有实用价值。
自然沉淀法的科学原理
血液由红细胞、白细胞、血小板等“有形成分”悬浮在血浆中构成,这些成分的密度不一样——红细胞密度约1.090g/cm³,血浆约1.025g/cm³,血清蛋白约1.035g/cm³。把血液静放着,重力会慢慢让不同密度的成分分层。
操作时,把加了抗凝剂的全血放进带刻度的试管,放在15-25℃的环境里静置就行。一般前30分钟红细胞沉得最快,1小时后分层就很清楚了,2小时左右能完成分离。上层澄清的液体是血清,下层红色的是红细胞层,中间乳白色的薄层里藏着白细胞和血小板。
操作细节与影响因素
温度对分离效果影响很大:25℃时红细胞下沉速度能比低温环境快40%。容器建议选直径15mm、长度100mm的试管,宽口短管的设计能加快分层速度。冬天操作的话,最好用恒温设备保持温度,避免太冷拖慢进度。
抗凝剂得用枸橼酸钠,和血液按1:9的比例混合才能维持血液状态。操作时千万不能晃试管——哪怕轻微晃一下,红细胞层的松散度都会增加60%,影响血清的纯度。
与离心法的对比分析
离心机靠3000转/分钟的加速度,5分钟就能做完自然沉淀2小时的活。离心法得到的血清很清,浊度(NTU)通常不到0.1,而自然沉淀法的血清浊度在0.3-0.5之间。要是急诊测肌钙蛋白,离心法的灵敏度能比自然沉淀法高100倍。
但自然沉淀法也有优势:比如在偏远地区用它诊断疟疾,准确率能到89.7%;突发停电时,用它能为血型鉴定抢出关键时间。
进阶技巧与风险防控
看分层效果可以用“斜角观察法”:把试管倾斜45度,好的血清应该是清澈透明的。如果血清浑浊或者有絮状物,得查是不是溶血(红细胞破了)或者脂血症(血液里脂肪太多)。还可以用“双管对照法”——拿两支试管一起操作,对比分层进度,就能判断环境稳不稳定。
操作要守“三不原则”:不放了超过24小时的样本,不处理已经凝固的血,不用加热加速沉淀。另外要注意,自然沉淀可能让血清里的钾浓度升高0.8mmol/L,做电解质检测时一定要标出来。
要是分层失败,试试“冷热交替法”:先放4℃冰箱冷藏30分钟,让成分先分出个大概,再移到37℃环境里完成分离。这方法能让分层成功率提到92%,但一定要控制好温度转换的时间。
医学检验得根据场景选方法,自然沉淀法虽然传统,在离心设备用不了的特殊情况下依然有用。掌握这项技术,不仅能应对设备故障,还能更懂血液的物理特性——当离心机“罢工”时,让血液自然沉降的方法,确实是个靠谱的替代方案。


